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400-021-2021
產品介紹
SNU-182 人肝癌細胞描述
該細胞系來自 24 歲亞洲男性。細胞包含單個細胞核，Southernblot 可檢測到乙型肝炎病毒(HBV)DNA，不表達乙肝病毒基因組 RNA，需在 2 級生物安全防護操作。
細胞特性
1） 來源：人 肝癌
2） 形態：上皮細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
SNU-182 人肝癌細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查發貨培養瓶的狀況，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3） 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。
5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基）。
6）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 收到細胞后di一次傳代建議1：2傳代 。
SNU-182 人肝癌細胞培養步驟
一．培養基及培養凍存條件準備：
1．準備1640（推薦iCell-0002）培養基,優質胎牛血清FBS 10%；GlutaMAX™-I（GIBCO,35050061) 2mM；Sodium Pyruvate(GIBCO 11360070), 1mM。P/S 1%
2. 培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3. 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
注：di一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3） 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例；
1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數板計數。
2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加基礎培養基和血清重懸細胞，再加入DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為8%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等；
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務；
二、細胞株/系服務
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書；
細胞系培養過程的技術指導；
細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等；
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養（有滋養層or無滋養層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎培養技術實習；
新藥及實驗儀器上市前評估；
四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他：根據客戶需要定制服務等
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